醫(yī)療儀器濾光片 酶標(biāo)儀濾光片,生化儀用窄帶通濾光片
深圳市賡旭光電專業(yè)濾光片生產(chǎn)廠家,歡迎定制采購!
深圳市賡旭光電專業(yè)生產(chǎn)醫(yī)療儀器濾光片 酶標(biāo)儀濾光片,生化儀用窄帶通濾光片.
尺寸:Ф12±0.1mm×5.0±0.5mm
常用型號為: BP420nm,BP505nm,BP546nm,BP578nm,BP600nm,BP635nm,BP670nm
也可根據(jù)客戶需求定制
中心通長為波長通長為:420nm,505nm,546nm,578nm,600nm,635nm,670nm
中心波長公差:±3nm
半帶寬:10nm±2nm
截止波段:200nm~λc~1100nm T<0.001%
峰值透過:T>40% (Tp>35% @ BP405nm)
外觀要求:80/50
特點:新型膜系結(jié)構(gòu)設(shè)計,離子輔鍍介質(zhì)膜工藝技術(shù)(IAD Hard Coating)制造,超凈化無塵環(huán)境生產(chǎn),高精密測試儀器檢測。
酶標(biāo)儀即酶聯(lián)免疫檢測儀是酶聯(lián)免疫吸附試驗的專用儀器又稱微孔板檢測器。可簡單地分為半自動和全自動2大類,但其工作原理基本上都是一致的,其核心都是一個比色計,即用比色法來進(jìn)行分析。 測定一般要求測試液的最終體積在250μL以下,用一般光電比色計無法完成測試,因此對酶標(biāo)儀中的光電比色計有特殊要求。
酶標(biāo)儀實際上就是一臺變相光電比色計或分光光度計,其基本工作原理與主要結(jié)構(gòu)和光電比色計基本相同. 圖示是一種單通道自動進(jìn)樣的酶標(biāo)儀工作原理圖.光源燈發(fā)出的光波經(jīng)過濾光片或單色器變成一束單色光,進(jìn)入塑料微孔極中的待測標(biāo)本.該單色光一部分被標(biāo)本吸收,另一部分則透過標(biāo)本照射到光電檢測器上,光電檢測器將這一待測標(biāo)本不同而強(qiáng)弱不同的光信號轉(zhuǎn)換成相應(yīng)的電信號.電信號經(jīng)前置放大,對數(shù)放大,模數(shù)轉(zhuǎn)換等信號處理后送入微處理器進(jìn)行數(shù)據(jù)處理和計算,最后由顯示器和打印機(jī)顯示結(jié)果. 微處理機(jī)還通過控制電路控制機(jī)械驅(qū)動機(jī)構(gòu)X方向和Y方向的運(yùn)動來移動微孔板,從而實現(xiàn)自動進(jìn)樣檢測過程.而另一些酶標(biāo)儀則是采用手工移動微孔板進(jìn)行檢測,因此省去了X,Y方向的機(jī)械驅(qū)動機(jī)構(gòu)和控制電路,從而使儀器更小巧,結(jié)構(gòu)也更簡單.
微孔板是一種經(jīng)事先包理專用于放置待測樣本的透明塑料板,板上有多排大小均勻一致的小孔,孔內(nèi)都包埋著相應(yīng)的抗原或抗體,微孔板上每個小孔可盛放零點幾毫升的溶液.
光是電磁波,波長100nm~400nm稱為紫外光,400nm~780nm之間的光可被人眼觀察到,大于780nm稱為紅外光。人們之所以能夠看到色彩,是因為光照射到物體上被物體反射回來。綠色植物之所以是綠色,是因為植物吸收的大部分為紅橙光和藍(lán)紫光,但對綠色不吸收,反射出來,所以植物呈現(xiàn)為綠色。酶標(biāo)儀測定的原理是在特定波長下,檢測被測物的吸光值。
隨著檢測方式的發(fā)展,擁有多種檢測模式的單體臺式酶標(biāo)儀叫做多功能酶標(biāo)儀,可檢測吸光度(Abs)、熒光強(qiáng)度(FI)、時間分辨熒光(TRF)、熒光偏振(FP)、和化學(xué)發(fā)光(Lum)。
酶標(biāo)儀從原理上可以分為光柵型酶標(biāo)儀和濾光片型酶標(biāo)儀。光柵型酶標(biāo)儀可以截取光源波長范圍內(nèi)的任意波長,而濾光片型酶標(biāo)儀則根據(jù)選配的濾光片,只能截取特定波長進(jìn)行檢測。
檢測單位
光通過被檢測物,前后的能量差異即是被檢測物吸收掉的能量,特定波長下,同一種被檢測物的濃度與被吸收的能量成定量關(guān)系。
檢測單位用OD值表示, OD是optical density(光密度)的縮寫,表示被檢測物吸收掉的光密度, OD=log(1/trans),其中trans為檢測物的透光值。根據(jù)Bouger-amberT-beer法則,OD值與光強(qiáng)度成下述關(guān)系:
E=OD=log(lo/Ι) 其中E表示被吸收的光密度, Ιo 為在檢測物之前的光強(qiáng)度,Ι為從被檢測物出來的光強(qiáng)度。
OD值由下述公式計算:
c為檢測物的濃度 b為檢測物的厚度 a為摩爾因子
在特定波長下測定每一種物質(zhì)都有其特定的波長,在此波長下,此物質(zhì)能夠吸收最多的光能量。如果選擇其它的波長段,就會造成檢測結(jié)果的不準(zhǔn)確。因此,在測定檢測物時,我們選擇特定的波長進(jìn)行檢測,稱為測量波長。
但是每一種物質(zhì)對光能量還存在一定的非特異性吸收,為了消除這種非特異性吸收,我們再選取一個參照波長,以消除這個不準(zhǔn)確性。在參照波長下,檢測物光的吸收最小。檢測波長和參照波長的吸光值之差可以消除非特異性吸收。
檢測值計算
儀器中的檢測器接收透過被檢測物的光能量,轉(zhuǎn)換成二進(jìn)位數(shù)字信號,最大為4095。儀器定義沒有光源下的透光值為 0%,沒有檢測物的透光值為100%。則實際檢測中,檢測物的透光值均在 0%一100%之間。透光值
的計算如下:
T=(Meas—Min)/(Max—Min)
其中T為透光值, Meas為檢測的二進(jìn)位數(shù)值, Min為在 0%的情況下檢測的二進(jìn)位數(shù)值, Max為在100%的情況下檢測的二進(jìn)位數(shù)值,舉例如下:
MaX=3600
Min=20
Meas=30
T=(30-20)/3600-20)=0.0028
OD=log(1/T)=log(1/0.0028)=2.552
中心定位
儀器會自動對酶標(biāo)孔進(jìn)行中心定位,中心定位是要消除酶標(biāo)孔底的凸凹引起的厚薄不均帶來檢測的不準(zhǔn)確。在對每一個酶標(biāo)儀進(jìn)行檢測時,儀器其實要進(jìn)行35個點的測量,選取最中間的5個點的均值為本孔的OD值。
光源的參照通道
參照通道是用來校準(zhǔn)由于電壓不穩(wěn)或燈泡磨損帶來的影響。
用途和其它提示
用于ELISA試劑的測定,廣泛用于各種實驗室,包括臨床實驗室。
質(zhì)量控制
質(zhì)量控制是試劑檢測的重要因素。請按照試劑說明書的要求進(jìn)行質(zhì)量控制。
空白校正
有一些試劑盒的說明書將空白孔設(shè)置為空氣,其它大多數(shù)空白孔的設(shè)置是用試劑來設(shè)置的,請按照試劑盒的說明書要求進(jìn)行。
檢測結(jié)果的解釋
由于有相當(dāng)多的因素會影響檢測的結(jié)果,如不同的酶標(biāo)板,檢測試劑的體積,都會造成OD值的不同,因此,只有使用同一酶標(biāo)板反應(yīng)的試劑檢測結(jié)果才能比較和分析。對結(jié)果的臨床解釋請依照試劑盒的說明書進(jìn)行.[1]
結(jié)構(gòu)
規(guī)格有24孔板,48孔板,96孔板等多種,不同的儀器選用不同規(guī)格的孔板,對其可進(jìn)行一孔一孔地檢測或一排一排地檢測.
酶標(biāo)儀所用的單色光既可通過相干濾光片來獲得,也可用分光光度計相同的單色器來得到.在使用濾光片作濾波裝置時與普通比色計一樣,濾光片即可放在微孔板的前面,也可放在微孔板的后面,聚光鏡,光欄后到達(dá)反射鏡,經(jīng)反射鏡作90°反射后垂直通過比色溶液,然后再經(jīng)濾光片送到光電管.
從酶標(biāo)儀工作框圖和光路圖上可看出,它和普通的光電比色計有以下幾點差異:
(l)盛裝待測比色液的容器不再使用比色皿,而是使用塑料微孔板.微孔板常用透明的聚乙烯材料制成,對抗原抗體有較強(qiáng)的吸附作用,故用它作為固相載體.
⑵由于盛樣本的塑料微孔板是多排多孔的,光線只能垂直穿過,因此酶標(biāo)儀的光束都是垂直通過待測溶液和微孔板的,光束既可是從上到下,也可以是從下到上穿過比色液.
⑶酶標(biāo)儀通常不僅用A,有時也使用光密度OD來表示吸光度.酶標(biāo)儀可分為單通道和多通道2種類型,單通道又有自動和手動2種之分.自動型的儀器有X,Y方向的機(jī)械驅(qū)動機(jī)構(gòu),可將微孔板L的小孔一個個依次送入光束下面測試,手動型則靠手工移動微孔板來進(jìn)行測量.
在單通道酶標(biāo)儀的基礎(chǔ)上又發(fā)展了多通道酶標(biāo)儀,此類酶標(biāo)儀一般都是自動化型的.它沒有多個光束和多個光電檢測器,如 12個通道的儀器設(shè)有 12條光束或 12個光源,12個檢測器和12個放大器,在X方向的機(jī)械驅(qū)動裝置的作用下,樣品12個為一排被檢測.多通道酶標(biāo)儀的檢測速度快,但其結(jié)構(gòu)較復(fù)雜價格也較高.
用途
可廣泛應(yīng)用于低紫外區(qū)的DNA、RNA定量及純度分析(A260/A280)和蛋白定量(A280/BCA/Braford/Lowry),酶活、酶動力學(xué)檢測,酶聯(lián)免疫測定(ELISAs),細(xì)胞增殖與毒性分析,細(xì)胞凋亡檢測(MTT),報告基因檢測及G蛋白偶聯(lián)受體分析(GPCR)等